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Mayta's Blog

AUTOR: Ma. Cristina Cóndor G

DE: Universidad Central de Ecuador

TÉCNICA DE ANÁLISIS MICROBIOLÓGICO

STAPHYLOCOCCUS EXPRESS PETRIFILM IN SELECTED MEAT, SEAFOOD AND POULTRY AOAC 2003.11

ALCANCE

Cárnicos

PRINCIPIOS

En la técnica de análisis microbiológico Staphylococcus Express Petrifilm 3M la placa contiene medio de cultivo el cual gelifica con agua fría. El medio cromogénico, modificado Baird-Parker (5-bromo-4-cloro-3-indoxil-beta glucopiranosida y sal disódica de 5-bromo-6-cloro-3-indoxil fosfato) es selectivo y diferencial para Staphylococcus aureus (Colonias rojo violeta).

En caso de aparecer colonias negras o azul-verde (colonias sospechosas), se puede utilizar “El Disco Express Petrifilm Staph para confirmar la colonia, el disco contiene un colorante y ADN. S. aureus produce desoxirribonucleasa y DNasa que reaccionan con el tinte para formar zonas de color rosa.

TOMA DE MUESTRAS:

CÁRNICOS: Muestrear como se indica en NTE INEN 776:2013 Carne y productos cárnicos. Muestreo

PREPARACIÓN DE MUESTRAS

Previo: Agua de peptona tamponada (APT): Preparar como se indica en la etiqueta del fabricante.

Recuerde: Encender el mechero 30 minutos antes de empezar todo el proceso.

 CÁRNICOS

  1. Homogenizar la muestra.
  2. Pesar 10 g de muestra y diluirla con 90mL de APT.
  3. Agitar por 15 segundos la dilución madre (1:10).
  4. A partir de la dilución madre 10-1 realizar las diluciones necesarias trasvasando 1mL de dicha dilución a tubos con 9mL de APT.

USO DE LA PLACA Staph Express Count Plate

 INOCULACIÓN

  1. Preparar e identificar el número de placas necesarias para el análisis (revisar Guía de Interpretación Staph Express Count Plate).
  2. Colocar 1mL de la muestra previamente preparada sobre la placa petrifilm levantando la película protectora y luego de inocular, bajar con cuidado dicha película evitando la formación de burbujas, utilice el dispersor para staphylococcus. Se pueden apilar máximo 20 placas.
  3. Realizar la siembra por duplicado.

INCUBACIÓN

Cárnicos: se incuban por 24hrs (±2hrs) a 35ºC (±1ºC) Según AOAC método oficial 2003.11.

INTERPRETACIÓN

 Todas las colonias rojo violeta corresponden a S. aureus. En caso de encontrar colonias sospechosas, utilice el disco express y deje incubar de 1 a 3horas a 35ºC, si alrededor de la colonia seleccionada como sospechosa aparece un halo rosado, la colonia pertenece a S. aureus (revisar Guía de Interpretación Staph Express Count Plate).

CÁLCULOS

Según “La Guía de Interpretación Staph Express Count Plate”

Recuerde:

Área de la placa: 30cm2

BIBLIOGRAFÍA

  • NTE INEN 1529-2:2013 Control microbiológico de los alimentos. Toma, envío y preparación de muestras para el análisis microbiológico.
  • NTE INEN 776:2013 Carne y productos cárnicos. Muestreo.
  • AOAC método oficial 2003.11.
  • Guía de Interpretación de Staph Express Count Plate

En el amor del Señor Jesucristo, espero que esta recopilación de información tanto bibliográfica como experimental, sean de edificación para tu vida.  

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