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Mayta's Blog

TÉCNICA MICROBIOLOGICA PARA LA DETECCIÓN DE LISTERIA SEGÚN LA AOAC método oficial 997.03./MAYTA/

Elaborado por: 
Química de alimentos Cristina Cóndor 
Universidad Central del Ecuador

18 AGOSTO DE 2015

ALCANCE

Ambiente y Superfiecies (útil para superficies de vegetales y frutas de tierra que no son precocidas).

Método que requiere validación interna para superficies vegetales y frutas.

PRINCIPIOS

En la técnica de análisis microbiológico Monitoreo de Listeria en ambientes 3M la placa es un medio de cultivo listo para usarse, que contiene agentes selectivos, nutrientes, un agente gelificante soluble en agua fría y un indicador cromogénico que facilita la detección de la colonias. La placa petrifilm puede ser utilizada para la identificación y/o conteo de Listeria en ambientes y superficies. Detecta Listeria monocytogenes, innocua, grayilmurrayi y welshimeri, sin embargo no diferencian estos organismos entre sí.

TOMA DE MUESTRAS:

  1. Con un hisopo estéril tome la muestra de la superficie de vegetal o fruta de tierra. Tome en cuenta que el hisopo que utiliza esté humedecido con 1mL de fluido de hidratación.
  2. El análisis que se realiza es cualitativo, por lo tanto hisope toda la superficie del vegetal o fruta.
  3. Adicione 2mL de APT al contenedor del hisopo, con el hisopo en contacto.
  4. Homogenice la muestra por aproximadamente 1 minuto.
  5. Permita que se recuperen o revitalicen las células de Listeria que puedan estar estresadas o dañadas mediante un reposo de 1 hora a 1,5 horas a temperatura de 20ºC a 30ºC.

Recuerde: Encender el mechero 30 minutos antes de empezar todo el proceso.

 INOCULACIÓN

  1. Preparar e identificar el número de placas necesarias para el análisis (revisar Guía de Interpretación Listeria en ambientes EL).
  2. Levantar la película protectora de la placa y colocar los 3mL del hisopo sobre la placa EL, luego de inocular, bajar con cuidado dicha película evitando la formación de burbujas, utilizar el dispersor adecuado. Se pueden apilar máximo 10 placas.
  3. Realizar la siembra por duplicado.

 INCUBACIÓN

Se incuban por 28hrs (±2hrs) a 35ºC (±1ºC) Según AOAC método oficial 997.03

 INTERPRETACIÓN

Todas las colonias color rojo-violeta son consideradas como presencia de Listeria (revisar Guía de Interpretación Listeria en ambientes EL).

Listeria: 

http://multimedia.3m.com/mws/media/444953O/3m-petrifilm-environmental-listeria-plate-interp-guide-spanish.pdf
No listeria: 
Photo mayta
Photo mayta

Si hay colonias color gris o rosa pálido dejar incubar hasta 30horas, si no cambia a color rojo-violeta, no se consideran colonias de Listeria.

http://multimedia.3m.com/mws/media/444953O/3m-petrifilm-environmental-listeria-plate-interp-guide-spanish.pdf

BIBLIOGRAFÍA

  • NTE INEN 1529-2:2013 Control microbiológico de los alimentos. Toma, envío y preparación de muestras para el análisis microbiológico.
  • AOAC método oficial 997.03.

Guía de Interpretación Listeria en ambientes EL

 

Anhelo esta información te sea útil, recuerda que esto es solo un pequeño impulso, tu puedes investigar más y poner a prueba la presente técnica.

En el amor del Señor Jesucristo, a tu servicio Mayta.

 

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